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Baseada nos personagens criados pela escritora de best sellers policiais Tess Gerritsen, Rizzoli e Isles conta as aventuras de Jane Rizzoli (Angie Harmon), uma detetive durona da polícia de Boston, e Maura Isles (Sasha Alexander), uma inteligente e impecavelmente vestida médica legista. Mesmo sendo completamente diferentes, essas duas mulheres desenvolvem uma química nada convencional. Elas se tornam grandes amigas e combinam seus conhecimentos formando um forte relacionamento profissional que ajuda a desmascarar alguns dos mais notórios criminosos de Boston.
Além dos problemas normais de toda mulher essas duas amigas precisam, entre um crime e outro, lidar com a protetora mãe de Rizzoli, Angela (Lorraine Bracco), com o ciúme de seu irmão, Frankie Jr (Jordan Bridges), um patrulheiro que sonha em se tornar um detetive, e os conflitos entre seu novo parceiro, o novato Barry Frost (Lee Thompson Young), e o antigo o detetive Vinnce Korsak (Bruce McGill).